液氮保存已成為工業(yè)微生物菌種保存的最好方法。BEOL青島貝爾智能揭秘工業(yè)微生物菌種保存的方法:

具體方法是：將細胞懸浮在一定的分散劑中，或直接冷凍瓊脂培養(yǎng)基上培養(yǎng)的菌株，然后移動到液氮中(-196 ℃)或液氮的氣相環(huán)境 (-156℃)保存。液氮冷凍保存應嚴格控制冷卻速度。

液氮冷凍保存微生物菌種的具體步驟是：制備冷凍保存菌種的細胞懸浮液，分裝到0.5～1 mL特殊耐低溫玻璃安瓿或液氮冷藏專用塑料瓶中，玻璃安瓿用酒精噴燈密封。然后以 (1-2) ℃/min冷卻速度冷卻，直到溫度達到相對溫度以上的細胞凍結(jié)點( 通常是 -30 ℃)。細胞凍結(jié)后，冷卻速度降至1 ℃ /min，直到溫度達到-50 ℃，將安瓿迅速移入液氮罐中 (-196 ℃ )或氣相(-156 ℃ )中保存。

如果無控速冷凍機，則一般可用如下方法代替：將安瓿或液氮瓶置于-70 ℃冰箱里冷凍4 h，然后迅速移入液氮罐保存。此外液氮冷凍保存，最常用的冷凍保護劑是二甲亞啶和甘油，使用濃度一般為甘油 10 %，二甲亞砜5 %。使用的甘油一般用高壓蒸汽滅菌，二甲亞砜進行過濾滅菌。